在Ni柱的使用中,应当避免缓冲液中存在还原剂和螯合剂,以免Ni2+被还原而脱落。如果柱料使用太久积累了很多杂蛋白,可用EDTA将Ni2+螯合下来,再用NaOH清洗柱料后,重新螯合Ni离子,即可完成再生。
镍柱具有高分辨率、高载量、流速快、物理和化学稳定性好等优点,适用于分离能被螯合的金属离子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白及带His标签的重组蛋白等。同时,再生和清洗也相对简便,使其成为蛋白纯化领域的重要工具。
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